酶标仪检查瘦肉精操作步骤如下：第一步：所有试剂及样品在开始检测前必须回升至室温（20-24℃），测定操作在20-24℃下进行。

　　第二步：用盒中缓冲液以体积1﹕10的比例稀释实际用量的克仑特罗抗体浓缩液（黑色盖），稀释前轻轻混均抗体，不要猛烈振荡。

　　第三步：取出实验需要数量的微孔板条，足够标准和样品所用的数量，标准和样品做两个平行试验，记录标准和样品的位置。剩余的微孔板条放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封，置于2-8℃冷藏。

　　第四步：每个微孔中底部加100μl稀释后的抗体溶液，室温（20-24℃）孵育微孔板15 min，避免光线照射。

　　第五步：孵育的同时进行酶标记物的稀释，用盒中缓冲液以体积1﹕10的比例稀释实际用量的克仑特罗酶标记物浓缩液（红色盖），稀释前轻轻混均抗体，不要猛烈振荡，避光放置。

　　第六步：洗板，甩出孔中液体，将微孔架倒置在吸水纸上拍打，直到纸上无明显水迹（拍打3次），以保证完全除去孔中的液体。用250μl蒸馏水充入孔中，再次甩掉微孔中液体，并在吸水纸上拍打，重复操作两次。加洗涤水的移液器管尖必须置于微孔上方约0.5 cm处打出洗涤水，避免将板孔中的游离抗体带入洗涤水中。洗板后立即进行下一步操作，不要让板孔干燥。

　　第七步：加入20μl标准或处理好的样品到各自的微孔底部，标准和样品做两个平行实验。

　　第八步：加入100μl稀释了的酶标记物至微孔底部，轻轻震荡微孔析并在桌面上作圆周运动以混匀。移液器管尖不要接触到孔中的混合物，避免交叉污染。

第九步：室温孵育微孔板30 min，避免放置，尽可能每隔10 min轻轻振荡1次，准备好酶基质/发色剂，并注意避光放置。

　　第十步：洗板，同第六步。在洗板过程中加洗涤水的移液器置于微孔板上方0.5 cm处打出洗涤水，避免将板孔中的游离酶标记物带入洗涤水中。

　　第十一步：不要让板孔干燥，迅速加入100μl酶基质/发色剂到每个孔中，步骤操作要迅速，避免头尾反应时间相差过长，轻轻振荡板并在桌面上作圆周运动以混匀。移液器管尖不要接触微孔中的混合物，避免交叉污染。

　　第十二步：室温暗处孵育微孔板15 min，暗处避光放置，同时准备好反应停止液。

　　第十三步：每孔加入100μl反应停止液，混匀，60 min内用酶标仪测量450 nm处波长吸光度值。

　　八、结果

　　所获得的标准和样品吸光度值的平均值除以第一个标准（0标准）的吸光度值再乘以100，并且以百分比的形式给出吸光度值。

　　吸光度值（％）＝ ×100

　　计算的标准值（吸光度值）绘成一个对应克仑特罗浓度（mg/kg）的半对数坐标系统曲线图，校正曲线在200-2000 ng/kg范围内应当成为线性。相对应每一个样品的浓度（ng/kg）可以从校正曲线上读出

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