核酸提取仪是如何操作,检测方法有哪些?
加入时间:2022-03-09 09:57:19 当前新闻点击率:961
春季到来,病毒开始活跃,导致疫情开始起伏,因此,利用做核酸来排查出有异常的情况,真正做到有效率的预防。那么,核酸提取仪是如何进行操作呢?有哪些检测方法。
从核酸采集、转运、灭活、到提取在到检测,分别涉及的体外诊断设备分别由:一次性病毒采样式子、一次性病毒采样管、样本保存液、核算提取试剂、核酸提取仪、RT-PCR检测仪,其中核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸提取工作的仪器,应用在疾病控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业和分子生物学研究等多种领域。 核酸的提取分别为DNA提取和RNA提取,二者的提取原理大致相同,简单来说分为细胞或者组织的裂解和核酸纯化两大步骤。核酸提取纯化方法常用的有酚/氯仿抽提法、离心柱法、磁珠法等。 1.酚/氯仿抽提法 乙烯氯仿提取DNA是利用酚是蛋白质的变性剂,反复抽提,使蛋白质变性,SDS将细胞膜裂解,在蛋白酶K、EDTA的存在下消化蛋白质或多肽或小肽分子,变性降解核蛋白,使DNA从核蛋白中游离出来。 2.离心柱纯化 离心柱结构主要是特殊硅基质吸附材料,能特异性吸附DNA,而RNA与蛋白质则会穿过。该方法能选择性地吸附核酸而不吸附蛋白质及盐,从而实现核酸与蛋白质及盐的分离,是目前试剂盒提取广泛使用的方法。 3.磁珠法 磁珠法是一种固相载体可逆化固定(SPRI)的分离纯化方法,主要原理为:在不同浓度的PEG中,会有不同片段大小的DNA吸附在磁珠的羧基修饰层上,这些DNA可以再溶解在水中,以此来洗脱回收。 |