磁珠法核酸提取仪的两种检测方法介绍,哪种方法效果更好
加入时间:2021-01-11 16:21:44 当前新闻点击率:2300
全自动核酸提取仪是用来自动完成样本核酸的提取工作的医疗设备,对比传统的手工提取核酸。全自动核酸提取仪只需在配套的试剂盒加入需要提取的样本,将试剂盒放核酸提取仪中,运行仪器自带编辑好的程序,15-60min便可完成一轮样本核酸提取工作。目前大部分的全自动核酸提取仪都是采用磁珠法的提取原理,下面,小编就给大家具体介绍一下磁珠法提取核酸。 磁珠法提取核酸是通过细胞裂解液裂解细胞,利用磁珠在高盐低PH值下吸附核酸,在低盐高PH值下与核酸分离的原理,从细胞中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面,而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。反应一定时间之后,再在磁场作用下,使磁性颗粒与液体分开,回收颗粒(即磁珠-DNA 混合物),再用洗脱液洗脱即可以得到纯净的DNA。
磁珠法核酸提取仪一般分为抽吸法和磁棒法两种: 抽吸法,也叫做移液法,是通过自动移液装置来进行。以磁珠法核酸提取仪为例,可通过自动移液装置来加入裂解液、磁珠吸附;抽走溶液,加入漂洗液,磁珠吸附,抽走漂洗液,加入洗脱缓冲液。由于抽吸法存在去除废液的时候不抽走磁珠,移液器不能靠磁珠太近,以防磁珠连同废液被抽掉的问题,影响洗脱效率和纯度。 磁棒法原理是在进行核酸提取时,将样品加入深孔板中进行裂解,将带磁性的分离设备浸入液体,通过磁场作用使混合物中能被磁性吸引的颗粒集中在分离设备表面,此后的洗杂过程由磁棒转移带有核酸的磁珠在不同的深孔板中完成,这种方案提取的核酸盐分残留低,纯度更高,并且不会出现堵柱子和枪头的情况。 简而言之,抽吸法和磁棒法的原理都是一样的,不同的是磁珠和液体分离的方式。抽吸法是通过固定磁珠、转移液体来实现核酸的提取,而磁棒法是通过固定液体,转移磁珠来实现核酸的分离,通过磁棒对磁珠的吸附将磁珠从废液中分离开,放入下一步的液体中,实现核酸的提取。 |