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全波段酶标仪采用酶联免疫吸附试验的基本原理
加入时间:2016-08-22 10:12:27  当前新闻点击率:2620

近年来,国内食品安全问题频出,从“瘦肉精事件”到“三氯氰胺事件”、“苏丹红事件”再“塑化剂事件”等等。这些事件的发生使得酶标仪开始走进人们的视野,不少地区的菜场都开始陆续配备此款医疗器械,常用为全波段酶标仪。那么全波段酶标仪采用酶联免疫吸附试验的基本原理是什么呢?

全波段酶标仪采用酶联免疫吸附试验的基本原理如下:

将过量特异抗体(或抗原)事先包被于载体(酶标板)上,通过抗原抗体反应使待侧物质(抗原或抗体)和酶标记物(用HRP-辣根过氧化物酶标记的抗体或抗原)也结合在载体上(固相分离),经洗涤去除游离的酶标记物后,加入底物,已经结合在载体上的标记酶促使底物显色。利用光电比色法,对待测物进行定性判断或定量测定。

此法检验灵敏度可以达到ng/ml水平。临床样本是血清。

包被酶标板:将特异抗原溶液加入酶标板孔内,4℃过夜。然后用洗涤液洗涤3-5次(手洗或洗板机进行洗板),这样溶液中的特异抗原被牢固吸附在酶标板的微孔表面,形成固相抗原,残液及杂质被清洗掉。

全波段酶标仪

(普朗医疗品牌---DNM-9602系列酶标分析仪

加患者样本液(病人血清),样本液中如果含有待测抗体,经过温育反应,则与已包被的抗原产生特异结合,生成包被抗原与待测抗体的复合物,被吸附在酶标板的微孔表面。然后再次进行洗涤,去除残液及干扰物质。

加酶结合物(特异抗原与酶的结合物),经过温育反应,生成包被抗原+待测抗体+酶标抗原的三者复合物,同样被吸附在微孔表面,然后再次洗涤,去除游离的或非特异沾附的酶结合物(洗板)。

加显色液(底物液,国内常用OPD、TMB两种显色底物液,检验波长分别为492nm和450nm),约经过10-20分钟显色反应,被吸附的复合物中的酶与显色底物液生成有色溶液。此时,由于游离或非特异吸附的酶已被清除,所以溶液颜色的深浅,仅决定于已与待测物结合的酶的量,因此能真实反映待测物的浓度。被固化的酶越多,显色越深,说明待测物浓度越大。

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