中国全自动血细胞分析仪发展概况与展望
加入时间:2011-12-20 10:04:28 当前新闻点击率:4605
传统血液学常规检查方法是借助于显微镜进行人工血液红细胞、白细胞计数和血涂片染色后显微镜进行肉眼人工白细胞分类,每检测一份标本至少要20分钟才能出检测报告,不仅检测项目少,且费时费力,准确性、可靠性受到一定影响,难以进行质量控制。到20世纪50年代经过医疗器械公司的工程师研究并开发的全自动双通道血细胞分析仪(Automated Heamatology Analyzer)问世以来,血细胞自动分析从单一的电阻抗技术发展成为多种技术的融合包括物理学、化学、免疫学、流式细胞术、信息处理技术、如体积传导光散射(VCS)、多角度偏振光散射(MAPSS)等,使对各种血细胞分析结果更加准确可靠;自动化方面,血细胞自动分析已由单一半自动不分类到的三分群/五分类(3/5-part differential)发展为血细胞自动分析的流水线,即将全血细胞计数(CBC)、网织红细胞(Ret)计数、外周血推片和染色等过程实现全自动化,临床应用方面,血细胞自动分析的检测参数由单一的血细胞计数结果发展为可向临床诊断,鉴别诊断、治疗和预后监测提供数二十多个参数。近年来,我国在血细胞自动分析领域也取得了十分可喜的成绩。目前,各级医院、乡镇、社区医疗机构血细胞分析仪已逐步得到普及,CBC检测结果的精密度和准确度明显提高;大中型医院检验科拥有多台血细胞分析仪,有的大型或教学医院还拥有全自动五分类血细胞分析仪;同时,各级医院已基本建立血细胞自动分析的质控程序,大大提高了全血细胞计数(CBC)的工作效率。 1、全自动血细胞分析仪的工作原理 1947年,美国科学家库尔特(W.H.Coulter)发明了粒子计数技术,它根据不导电颗粒经过阴阳电极间的充满电解质溶液的小孔时,会产生的瞬间电阻变化,来感知颗粒的大小和数量,91212称为电阻法原理,又称库尔特原理。50年代初应用于血细胞计数,依据血细胞非特异性的性质,对电解质溶液中悬浮颗粒(血细胞)在通过小孔时引起的电阻变化进行检测,现市售的血液分析仪基本都采用该原理设计。另一种方法是光散射测量法,同电阻抗法一样,全血标本首先按一定比例稀释成细胞悬液,在鞘液的作用下,形成细胞流,细胞被排列成单列快速通过光学检测区,当液流中的细胞与测定光束相交时,由于血细胞组成与鞘液不同,引起光散射变化,从不同角度检测散射光信号,可以获得与细胞体积结构有关的信息,以此来进行细胞计数及体积测定。 血细胞分析仪在分析计数过程中采用库尔特原理,根据细胞在测试过程中产生的脉冲幅度与仪器设备的阀值比较而得出。作为全血其细胞数量达10 个/L之多,直接通过小孔计数难以将每个细胞所形成的脉冲信号区分开来,为此必须对全血进行稀释,以便于仪器计数,这就需要仪器使用最基本的试剂——稀释液,以便对全血进行稀释。全血中白细胞数量约为10个/L,而红细胞计数达10个/L,前者小于后者1000倍。如采用电阻抗法计数时,仪器只能识别有多少个颗粒,而无法识别哪个为红细胞,哪个为白细胞。为了进行血细胞计数与分类,仪器设计采用另一种试剂——溶血剂,它可以将红细胞溶解掉 (溶血作用),再进行计数,就得出全血中白细胞数量。每份标本测定完毕之后,都要对仪器管道、小孔、计数池等进行清洗,以免相互干扰。所以仪器还要用到起清洗作用的试剂——清洗剂。有些仪器功能较强,对白细胞还可进行五分类,此时还用到了鞘液、染色液等试剂。 3、血细胞分析仪配套试剂的作用 根据稀释液在使用过程中所起的作用,要求其是具有酸碱缓冲作用,适当的离子强度和电导率的等渗液。适当的离子强度和与血浆相同的渗透压能在一定时间内完整地保持血细胞原来的体积 而合适的电导率能保证获得与细胞体积,相应的脉冲大小 溶血剂则是一类强的表面活性剂,它的作用一方面是溶解红细胞,进行白细胞分类与计数,另一个作用是溶解红细胞,释放出血红蛋白(HGB),形成稳定的血红蛋白衍生物,进行血红蛋白的测定。不同种类的溶血剂对白细胞形状、大小影响不同,如十六烷基三甲基溴化铵能使白细胞膜皱缩,胞体缩小,而皂素能使白细胞体积增大。同一种溶血剂浓度高低不同,对白细胞体积影响也不同,通常是随着溶血剂浓度增高,白细胞体积缩小,测量时脉冲也变小。随着溶血剂的用量增加或溶血时间的延长,白细胞破裂,皱缩在细胞核周围的胞浆颗粒及胞膜脱落,而仅剩细胞核。清洗剂则主要是清洗管道,避免标本之间污染。 |